华中农业大学实验动物中心模式动物平台于2015年建立，平台主要提供小鼠的净化与扩繁、基因全敲除小鼠模型构建、基因点突变小鼠模型构建、基因条件敲除/基因敲入小鼠模型构建、小鼠精子冷冻保存与复苏等技术服务。平台于2019年建立转基因/基因编辑小鼠动物模型的共享精子库。
      一、业务介绍
1. 转基因小鼠制备
由客户提供转基因质粒图谱、质粒DNA及其相关序列信息，平台负责质粒鉴定、酶切线性化DNA制备、小鼠受精卵显微注射、注射受精卵移植、移植小鼠孕期观察饲养、新生小鼠出生记录及生命维持、编号及鼠尾基因组DNA抽提、转基因阳性小鼠的PCR鉴定等。
技术指标：显微注射用受精卵采自C57BL/6J(♀)与CBA（♂）的F1代；胚胎移植（受精卵输卵管移植）受体采用ICR代假孕母鼠；受精卵供体、受体及新生仔鼠均维持在SPF级小鼠饲养环境；获得转基因质粒六个月内提供3只以上鼠龄4-6周的转基因阳性小鼠（杂合子Founder），雌雄不限。

2. 全基因敲除小鼠模型制备
根据客户的需求进行打靶载体构建，由客户提供目标基因的Ensembl序列号，并提出拟剔除区域；平台科研人员设计打靶策略，并反馈客户，经客户确认后进行打靶载体的构建及后续研发。平台承诺提供3只以上阳性小鼠。
技术指标：显微注射用受精卵采自C57BL/6J(♀)与CBA（♂）的F1代；胚胎移植（受精卵输卵管移植）受体采用ICR代假孕母鼠；受精卵供体、受体及新生仔鼠均维持在SPF级小鼠饲养环境；阳性小鼠需通过测序证实待敲基因的序列。

3. 条件性基因敲除或敲入小鼠模型制备
根据客户的需求进行打靶载体构建，由客户提供目标基因的Ensembl序列号，并提出拟剔除（或敲入）区域；平台科研人员根据客户的需求确定flox或敲入片段插入的区域，经认可后平台科研人员设计打靶策略，并反馈客户，经客户确认后进行打靶载体的构建及后续研发。平台承诺提供3只以上阳性小鼠。
技术指标：显微注射用受精卵采自C57BL/6J(♀)与CBA（♂）的F1代；胚胎移植（受精卵输卵管移植）受体采用ICR代假孕母鼠；受精卵供体、受体及新生仔鼠均维持在SPF级小鼠饲养环境。对于基因敲入、flox小鼠各阶段均需通过测序证实敲入基因的存在和序列正确。

4. 模型小鼠胚胎冻存保种
由客户提供转基因或基因敲除雄鼠，平台负责将该小鼠与超排的C57BL/6J交配，取桑椹胚阶段的胚胎，并采用玻璃化冷冻的方法进行胚胎冻存，保存在液氮中。
客户提供5-10只6-8周龄雄鼠（转基因阳性鼠或基因敲除杂合子/纯合子雄鼠），并提供基因修饰鼠基因型鉴定的引物及条件；平台负责小鼠基因型复检（PCR方法），将超排后的4-6周龄C57BL/6J雌鼠与基因修饰雄鼠交配，取桑椹胚阶段的胚胎，每个品系冻存200枚桑椹胚阶段的胚胎。
5. 冻存小鼠胚胎复苏繁殖
冷冻保存的胚胎由客户运至平台（液氮中运输），平台按照客户提供的冻存及复苏方法，复苏胚胎，并将胚胎移植到假孕母鼠体内（输卵管移植或子宫移植），仔鼠出生记录及基因型鉴定等。
技术指标：胚胎复苏并将胚胎移植到假孕母鼠ICR的子宫（每侧移植6枚囊胚）内，受体鼠及新生鼠均维持在SPF级小鼠饲养环境中。平台保存的胚胎复苏后，提供5只以上SPF级转基因阳性鼠或基因剔除杂合子小鼠，雌雄不限；客户提供的冷冻胚胎复苏移植后，所有出生的仔鼠均提供给客户。
6. 小鼠胚胎注射 （包括原核胚注射和囊胚注射）
由客户提供待注射物品，平台负责小鼠胚胎的显微注射、胚胎的移植、移植小鼠孕期观察饲养、嵌合体小鼠出生记录、生命维持等。
技术指标：显微注射用胚胎取自C57BL/6J或ICR(由客户选择)；胚胎移植（受精卵子宫内移植）受体采用ICR代假孕母鼠；胚胎供体、受体及新生仔鼠均维持在SPF级小鼠饲养环境。

7. 小鼠胚胎操作及品系建立
平台还可进行小鼠卵子、精子和胚胎的采集、冻存和复苏；并可进行体外受精、显微受精、克隆、胚胎生物净化、小鼠嵌合胚胎的制备和四倍体胚胎拯救等技术服务。收费标准视具体情况而定。

8. 显微操作培训
平台还提供显微操作技术培训，包括显微操作针的制备、显微受精、核移植、胚胎注射等。

二、联系方式
平台公众号：华中农大实动中心模式动物平台
电话/微信：15515144645（方老师）
电子邮箱：1754401613@qq.com